苏云金芽孢杆菌δ－内毒素cryla?基因在大肠杆菌和变铅青链霉菌中表达

利用合成的寡聚核苷酸片段，从质粒pos1000中分离出具有适合克隆位点的苏云金芽孢杆菌(bacillusthuringiensis)δ－内毒索cryla?全长基因。将该基因与大肠杆菌表达载体pkk223-3重组，并引入大肠杆菌jml09中，经iptg诱导．获得了超量表达的cryia?蛋白。将cryla?全长基因插入链霉菌表达载体phzl272中，得到重组质粒phzl256，将该质粒引入变铅青链霉菌(streptomyces　lividans)jt46中，经硫链丝菌素诱导．通过westerablotting测定表明，重组变铅青链霉菌jt46(phzl256)已表达出相应的cryla?蛋白。杀虫试验表明，大肠杆菌和链霉菌所表达出的δ－内毒索cryla?对小菜蛾均有毒杀作用，其致死率分别为93％和57％。