人mcpcdna在nih3t3细胞中表达及功能研究

通过构建表达人膜辅因子蛋白mcp编码区全长cdna的重组载体pcdna3mcp,以磷酸钙沉淀法转染nih3t3细胞,用g418筛选阳性克隆,并鉴定mcpcdna在细胞中的表达。将血清梯度稀释并与细胞孵育,然后检测细胞活力:灭活的人血清不能引起对照细胞与mcp转染细胞的胞毒作用,而新鲜人血清可使对照细胞发生补体依赖的细胞毒反应,mcp转染细胞由于mcp蛋白的合成,细胞受到保护不发生该反应。另外,mcp转染细胞只获得对人补体的抵抗能力,对兔、豚鼠补体与对照细胞一样有不同程度的细胞裂解,在细胞水平上人同种限制因子的表达可以保护异源细胞免受人补体的攻击。