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生物工程学报 2003
糖多孢红霉菌同源片段长度与染色体重组率关系的研究Abstract: 为了探索同源片段长度与糖多孢红霉菌染色体同源重组率的关系,化学合成或用重叠pcr合成带有突变位点、在突变位点两侧长度为(26bp+27bp)、(500bp+576bp)和(1908bp+1749bp)的同源序列,克隆于糖多孢红霉菌同源重组载体pwhm3后,分别构建了pwhm1113、pwhm1116和pwhm1119质粒。以peg介导转化糖多孢红霉菌a226原生质体,3个质粒分别获得每皿30个、69个和170个转化子,但pwhm1113质粒不能与染色体有效整合,pwhm1116质粒与染色体整合率为转化子的2%,而pwhm1119质粒与染色体整合率达到转化子的19%。pwhm1116和pwhm1119质粒均可进行有效的染色体二次重组,将突变位位点引入染色体。因此,同源片段长度为(500bp+576bp)或更长时,可与糖多孢红霉菌染色体进行有效的单重组和双重组。
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