低温菌启动子探针质粒的构建

为了在宿主菌acinetobactersp.dwc6中构建低温菌蛋白表达载体，以pbr322质粒为基础，去除质粒上β-内酰胺酶基因的启动子片段，取而代之为来源于质粒pjrd215的卡那霉素抗性基因片段，并在pbr322中插入acinetobacter菌属特异性ori的dna片段，构建了能在acinetobactersp.dwc6和e.coli中正常复制的启动子探针质粒pbap1。通过在质粒pbap1中的β-内酰胺酶基因上游随机导入acinetobactersp.dwc6基因组片段，通过检测宿主细胞的氨苄青霉素抗性和β-内酰胺酶活性，来筛选强启动子片段，并分析了启动子探针质粒载体的功能及启动子的强度。