重组n-乙酰鸟氨酸脱乙酰基酶的表达、纯化和复性研究

报道重组n-乙酰鸟氨酸脱乙酰基酶（naoase）的研究进展。重组naoase由大肠杆菌arge基因编码，在重组菌bl21(de3)-pet22b-arge中的表达量为32.5％，大多以无活性的包涵体存在。低温诱导可增大有活性的可溶表达部分的比例。可溶性naoase经ni-nta凝胶亲和纯化后得到sds-page电泳纯的酶，比酶活为1193.2u/mg蛋白。诱导条件影响整菌蛋白的成分及比例。37℃诱导生成的包涵体经尿素梯度洗涤后纯度较22℃高。低的蛋白浓度和合适的氧化还原体系是影响复性的关键因素。稀释法和透析法皆可使包涵体部分复性。在合适的条件下以稀释法复性时，约有17.78%包涵体可顺利复活。包涵体经尿素洗涤、溶解、ni-nta凝胶柱亲和纯化后，获得了高纯度的naoase。