复合抗菌肽pl在毕赤酵母中的分泌表达及其活性研究

为了获得抗菌活性较强的抗菌肽，将几种抗菌肽串联起来在毕赤酵母中表达，并比较其与单独抗菌肽的抑菌活性。以genbank中的protegrin_1(pg-1)、scorpiondefensin(sd)、metalnikowin_2a和sheepmyeloidantibacterialpeptide(smap_29)(序列号分别为aab27599，aaab27538、p80409和p49928)成熟肽段作为模板序列，根据巴斯德毕赤氏酵母(p.pastoris)偏好密码子，设计并人工合成复合抗菌肽pl基因，同时用soe法获得scorpiondefensin的基因，分别克隆到ppiczαa载体中，转化p.pastoris受体菌x-33，在醇氧化酶(aox)启动子调控下，复合抗菌肽pl及sd均获得表达。体外抑菌试验检测复合抗菌肽pl与单独的蝎子防御素sd的热稳定性、酸稳定性、最低抑菌浓度等，结果显示复合抗菌肽pl及sd具有很强的热酸稳定性，而针对不同的细菌，复合抗菌肽则表现出了强于单独的sd的活性，特别是对大肠杆菌。上述结果说明了该复合抗菌肽具有很好的开发前景。