hiv-1膜蛋白在甲醇型酵母中的表达和抗原性的研究

通过计算机辅助分析了中国广西b/c重组亚型hiv-1病毒株的env蛋白（共851氨基酸残基）氨基酸的疏水性、潜在的抗原表位，与其它亚型的env蛋白在氨基酸组成的保守性方面进行了比较，选择了env基因的469-511aa，538-674aa和700-734aa三段保守性及抗原性都较强的氨基酸序列构建成嵌合基因，将嵌合基因构建到毕赤酵母pichiapastoris表达载体ppiczαb中，利用甲醇诱导表达，对表达的蛋白进行了westerblot和sds-page分析，结果表明，三段基因能在毕赤酵母pichiapastoris中表达，产物为40kd的特异性诱导糖蛋白，通过ni-sepharose4b金属ni螯合层析柱分离纯化表达蛋白，酶联免疫检测结果表明，纯化的抗原有很强的抗原特异性,可以用于hiv检测试剂的研制和开发。