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生物工程学报 2007
利用同源蛋白的信号肽和前肽序列在cho细胞中表达重组人bmp6Keywords: bmp6,中华仓鼠卵巢细胞,重组表达,骨诱导作用 Abstract: bmp6属于tgf-β超家族,具有较强的骨诱导作用。主要利用bmp6自身的信号肽、前肽与成熟肽基因序列构建了表达质粒pcdna-bmp6;同时利用bmp2的信号肽、前肽与bmp6的成熟肽基因序列构建了表达质粒pcdna-bmp2/6。将两种质粒分别瞬时转染cos7细胞,发现质粒pcdna-bmp2/6表达rhbmp6的效率高于质粒pcdna-bmp6。然后将质粒pcdna-bmp2/6与含二氢叶酸还原酶基因(dhfr)的表达质粒共转染dhfr缺陷型的中华仓鼠卵巢(cho)细胞,经g418筛选、氨甲蝶呤(mtx)介导目的基因扩增、亚克隆后得到表达rhbmp6成熟肽的单克隆细胞株。将表达产物rhbmp6初步纯化后,能诱导前成肌细胞系c2c12向成骨细胞方向转化,显示其具有骨诱导作用。
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