可溶性人spd-l1及其抗体的制备和鉴定

通过固定化金属离子亲和层析进行柱上复性与纯化，获得高纯度的可溶性pd-l1胞外域(spd-l1)，其纯度达95%，纯化的spd-l1经免疫印迹分析得到验证，并具有与其受体pd-1的特异性结合活性；以该抗原免疫小鼠获得高滴度的抗血清，并以制备的spd-l1-hitrap亲和层析柱纯化获得高纯度特异性抗体；将该抗体与另一商业化抗体结合建立了一种灵敏的双夹心elisa法，检测范围为1ng/ml～100ng/ml，可用于分析可溶性pd-l1的含量。可溶性spd-l1及其抗体的制备不仅可用于人体内特异性抗体和可溶性pd-l1的检测，同时也为进一步研究其体内外活性及其受体的性质提供了条件。