利用gfp/rfp双荧光指示载体鉴定特异性启动子功能

在基因表达定位或启动子调控模式的研究中,多以gusa作为报告基因。但由于部分组织中高内源gus背景活性或转化手段的限制,使判断基因表达定位或调控时存在很大误差。为了解决上述问题,本实验将报道基因绿色荧光蛋白(gfp)和红色荧光蛋白(rfp)融合构建双荧光标记瞬时表达载体pbi221-rfp/gfp。该载体以camv35s启动子驱动gfp确定转化效率,通过鉴定阳性个体的红色荧光活性分析目的基因或启动子的表达模式。并通过番茄e8和西瓜agpl1果实特异启动子验证了该载体在启动子调控模式研究中的应用可行性。结果表明pbi221-rfp/gfp是一个可以在基因和启动子功能验证中应用的高效瞬时表达载体。