水稻小g蛋白ospra2基因的克隆及功能分析

利用microarray技术对水稻幼苗在营养胁迫条件下根部基因表达的研究中发现:一个与豌豆pra2(小g蛋白)基因有同源性的基因的rna水平在营养胁迫后再补充营养时,表达量下降。用rt-pcr和pcr方法分别获得该基因的cdna克隆—ospra2和该基因翻译起始位点上游1kb的启动子序列。ospra2基因编码的蛋白质具有结合gtp/gdp的4个保守结构域和构成小g蛋白rab家族的特有的结构域。该基因cdna与gst蛋白基因融合表达载体在洋葱表皮细胞中的瞬间表达结果显示该蛋白定位在在细胞膜和细胞核上,ospra2基因启动子与gus报告基因融合表达转基因水稻显示该基因启动子驱动gus在胚芽鞘和根中表达,35s启动子驱动ospra2基因过表达转基因水稻与野生水稻株型相比明显矮化,类似br缺陷型植物株型。本实验还对ospra2和p450蛋白的相互作用及在br代谢途径中的可能作用进行了分析。