玉米黑粉菌cyp51基因结构分析与克隆表达

通过生物信息学手段分析cyp51基因结构,并根据genbank登记的玉米黑粉菌cyp51dna序列,设计cyp51引物和两对分别截短不同跨膜区的突变体引物,构建了多种重组表达质粒及突变体重组表达质粒。选用不同宿主菌包括escherichiacolibl21(de3)、bl21(de3)plyss和rosetta(de3)诱导表达并优化条件。sds-page分析结果表明:只有突变体pet32-yh-35能够在e.colibl21(de3)中高效表达(30oc,0.5mmol/liptg诱导)。通过与戊唑醇等4种商品化杀菌剂农药和14种xf系列农药先导化合物的紫外结合光谱分析表明:重组蛋白具有生物学活性。其中一种xf系列化合物的结合常数接近商品化杀菌剂,有可能开发为新的杀菌剂,为设计开发新型高效抗真菌新药提供了理论依据。