il-1ra-fce融合基因的克隆、表达及鉴定

白细胞介素-1与免疫球蛋白e在过敏性哮喘发病中发挥着重要作用。本试验克隆了白细胞介素-1受体拮抗剂(il-1ra)及ige分子恒定区cdna片段,构建了融合基因原核表达载体il-1ra-fce/pbv220。将其转化大肠杆菌bl21(de3),实现了融合蛋白的高效表达,westernblotting结果表明表达蛋白为目的融合蛋白,主要以包涵体形式存在;利用分子筛和阳离子交换层析对表达产物经进行了纯化,纯化的包涵体复性后经体外功能试验表明,融合蛋白的活性与il-1ra没有显著性差异;初步药代动力学分析显示il-1ra-fce半衰期比il-1ra延长了4.78倍。