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生物工程学报 2013
利用毕赤酵母系统直接分泌表达具有活性的谷氨酰胺转胺酶, PP. 180-188 Keywords: 谷氨酰胺转胺酶,毕赤酵母,拷贝数,共表达,高密度发酵,酶原序列 Abstract: 使用异源表达系统直接分泌表达具有活性的微生物谷氨酰胺转氨酶(microbialtransglutaminase,mtg)是目前最具前景的mtg生产方法之一,但由于产量较低无法实现工业化生产。毕赤酵母是近年来发展出的高效蛋白表达系统。通过采用pro序列与成熟mtg基因共表达的策略,成功地实现了用重组毕赤酵母分泌表达具有活性的茂原链霉菌streptomycesmobaraensemtg。进一步通过对pro序列和mtg基因拷贝数以及重组酵母培养条件的优化,最终使得mtg在1l发酵罐中高密度发酵的酶活达到7.3u/ml,为mtg的工业化生产奠定了基础。
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