保守的第52位色氨酸突变引起的胰高血糖素样肽1受体n端片段活性丧失

通过易错pcr方法建立了一个鼠肺不同长度的nglp-1r(从第21个氨基酸开始到第145个氨基酸)的噬菌体随机突变展示肽库，通过噬菌体表面展示技术检测胰高血糖素样肽1受体n端片段(nglp-1r)在缺失一段或两段基因后是否还具有结合exendin-4的活性。经elisa分析发现了一株无结合活性的突变株，命名为ep16。经测序比对，发现ep16缺失了前20个和后10个氨基酸，且第52位色氨酸突变为精氨酸。为确定ep16与exendin-4无结合活性的原因，重新构建了无前20个和后10个氨基酸的ep16野生型及第52位色氨酸变为精氨酸的全长nglp-1rw52r与ep16进行对比分析。结果表明，ep16的活性丧失是由保守的第52位色氨酸突变为精氨酸引起的，缺失的前20个和后10个氨基酸没有影响其生物学活性。关键位点单个氨基酸残基的突变可以改变胰高血糖素样肽1受体n端片段整个蛋白质的生物学活性。