传染性法氏囊病病毒vp4蛋白单克隆抗体的制备及鉴定

传染性法氏囊病病毒(ibdv)蛋白vp4在抑制宿主免疫应答中起重要作用，为制备ibdvvp4的单克隆抗体，以实验室保存的融合蛋白his-vp4免疫balb/c小鼠，经过细胞融合、筛选、亚克隆后获得4株能稳定分泌抗vp4的单抗杂交瘤细胞株，分别命名为3b3、3h11、4c8和4g6，经间接elisa测定4株单抗的亲和力解离常数分别为4.61×10–11、1.71×10–10、4.26×10–11和5.02×10–11，均为高亲和力抗体。4株单抗的重链类型分别为igg1、igg1、igg2b和igg1。进一步以westernblotting鉴定，该4株单抗均能特异地识别ibdv的vp4蛋白，间接免疫荧光和westernblotting试验表明4株单抗均能识别ibdv感染df-1细胞后产生的vp4蛋白。该单抗为检测ibdv以及研究ibdvvp4的生物学作用奠定了基础。