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生物工程学报 2014
丹参悬浮培养细胞原生质体的制备和活力检测DOI: 10.13345/j.cjb.140014, PP. 1612-1621 Keywords: 丹参,原生质体,激光共聚焦,fda,fluo-3/am Abstract: 对丹参悬浮培养细胞原生质体制备条件进行了研究,并利用fda染色和钙离子荧光探针fluo-3/am装载对制备得到的原生质体的活力和功能进行了检测。丹参悬浮培养细胞原生质体的制备条件为:悬浮培养细胞酶解的适宜酶液组合为纤维素酶1.5%、果胶酶0.3%,离析酶0.5%;适宜的甘露醇浓度为0.4mol/l;酶解时间为12h;在600r/min转速下离心5min收集,纯化得到原生质体,其产量为1.1×106/gfw,fda检测显示其活力为95%以上,荧光探针fluo-3/am可成功装载到原生质体中。
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