大肠杆菌pts系统改造及重组菌生长性能测定

利用red重组系统对野生大肠杆菌escherichiacoli磷酸烯醇式丙酮酸?糖磷酸转移酶系统(phosphoenolpyruvate:carbohydratephosphotransferasesystem,pts)进行修饰改造，敲除pts系统中关键组分eⅱcbglc的编码基因(ptsg)，磷酸组氨酸搬运蛋白hpr的编码基因(ptsi)，同时敲入来源于运动发酵单胞菌zymomonasmobilis的葡萄糖易化体(glucosefacilitator)编码基因(glf)，构建重组大肠杆菌，比较测定并系统评价了基因敲除和敲入对细胞的生长、葡萄糖代谢和乙酸积累的影响。敲除基因ptsg和ptsi造成大肠杆菌pts系统部分功能缺失，细胞生长受到一定限制，敲入glf基因后，重组大肠杆菌能够利用glf-glk(葡萄糖易化体-葡萄糖激酶)途径，消耗atp将葡萄糖进行磷酸化并转运进入细胞。通过该途径转运葡萄糖能够提高葡萄糖利用效率，降低副产物乙酸生成，同时能够使更多的碳代谢流进入后续相关合成途径，预期能够提高相关产物产量。