构建一种基于双启动子模型的特异性检测镉离子的大肠杆菌传感器

为构建一种能够特异性检测镉离子的大肠杆菌荧光报告菌株，本研究通过对检测元件模式和荧光蛋白的筛选后，以蓝色荧光蛋白mtagbfp2基因作为报告基因，使用双启动子模式，构建融合报告载pmer::merr-m-pmer::mtagbfp2-pmd19-t。然后将报告载体转化至e.colimc4100菌中，构建特异性检测镉离子的微生物传感器，并对此微生物传感器进行了最佳培养基、起始诱导浓度和时间、最适检测范围等相关参数的确定，以及对特异性进行了测定。研究表明，此微生物传感器检测镉离子背景信号低，选定起始菌液浓度为od600=0.1，于ihmm培养基中诱导2h为最佳检测条件，检测镉离子线性浓度范围为0.1?75μmol/l，并且只对cd2+响应，特异性较高。因此，本研究成功构建了能够特异性检测镉离子的生物传感器，为重金属微生物传感器的优化研究工作提供了有用方案。