原生质体融合选育高产脂肽li-f多粘类芽胞杆菌及融合菌株表达差异分析

本研究以多粘类芽胞杆菌jsa-9前期诱变获得的两株带有营养缺陷型标记的菌株n1-37(phe–)和n2-27(his–)作为亲本菌株，采用聚乙二醇作为促融剂，进行原生质体融合，筛选出高产li-f类抗菌脂肽的融合菌株。通过hplc对融合菌株和原始菌株产li-f类抗菌脂肽进行定量检测，并利用实时荧光定量pcr对菌株jsa-9和融合菌株中li-f类抗菌脂肽合成酶的关键基因fusa1、fusa2、fusc1和fusc2的差异性表达进行分析。结果表明，经过原生质融合获得一株li-f类抗菌脂肽高产菌株f5-15。菌株f5-15的li-f类抗菌脂肽产量为原始菌株产量的3.1倍，li-f类抗菌脂肽合成酶的4个关键基因在融合菌株f5-15中的表达量分别是其在原始菌株jsa-9中的10.48、2.48、2.1和11.8倍。