重组质粒pudk-hgf的中试纯化工艺

pudk-hgf是携带人肝细胞生长因子的裸质粒，目前已进入i期临床试验，因此需要大量符合药学规格的质粒dna。文中建立了pudk-hgf中试规模纯化制备的新工艺。流程包括：发酵、离心收获菌体、碱裂解、超滤浓缩碱裂解液、sephacryls-1000层析除去rna并更换缓冲液、plasmidselect捕获超螺旋质粒dna、琼脂糖凝胶6bff除盐。新工艺可获得浓度为2.0mg/ml、纯度在1.70以上的裸质粒原液，符合相关质量标准，并避免使用动物源性的酶及有毒试剂。