牛c-myc基因的克隆及其在皮肤成纤维细胞中的表达

为了构建包含牛c-myc基因编码序列的重组载体，以胎牛原始生殖嵴为材料，用rt-pcr方法克隆出牛c-myc基因的编码序列，将其亚克隆至pmd19-t载体，再从酶切鉴定和测序正确的质粒上切下目的片段，定向克隆到pires2-acgfp1-nuc表达载体上，挑选序列正确的重组真核表达质粒转染牛皮肤成纤维细胞，用rt-pcr和westernblotting分别检测c-mycmrna和蛋白的表达。结果表明，从胎牛原始生殖嵴中正确克隆了c-myc基因的全长编码序列，所构建的重组质粒能够在皮肤成纤维细胞中有效