7号淀粉酶链霉菌m1033菌株葡萄糖异构酶在大肠杆菌中的高效表达

从已克隆的含７号淀粉酶链霉菌ｍ１０３３菌株产葡萄糖异构酶基因的质粒ｐｕｂ中，用ｄｄｅｉ和ｋｐｎｌ酶解，分离出酶结构基因，以平端方式与大肠杆菌质粒ｐｔ７-７连接，构建了重组表达质粒ｐｔｋｄ-ｇｉ。将ｐｔｋｄ-ｇｉ转化到特异大肠杆菌寄主ｋ３８，经４２℃热诱导，所产葡萄糖异构酶占菌体可溶性蛋白３５％。通过ｄｅａｅ－ａ５０柱和ｇ－１５０柱层析，发酵液可获电泳纯蛋白３４ｍｇ／ｌ。