在大肠杆菌中提高人α1b型基因工程干扰素的表达

将人α１ｂ型干扰素（ｉｆｎ-α１ｂ）基因插入带有原核增强子样序列的新型载体ｐｂｖ３２２，使干扰素在大肠杆菌中的表达水平明显高于原表达载体，达到１.６×１０８ｕ／ｌ培养液。重组质粒的特点是：含增强子序列ｘ，ｔｒｐ启动子控制。利用ｄｅａｅ-ｓｅｐｈａｒｏｓｅ、ｃｍ-ｓｅｐｈａｒｏｓｅ离子交换层析及单克隆抗体亲和层析纯化ｉｆｎ-α１ｂ，获得了电泳纯产品，其比活性为２×１０７ｕ／ｍｇ，分子量为１９ｋｄａ。此外，用ｐａｔ１５３代替ｐｂｖ３２２，构建了带有和不带有ｘ序列的两种表达载体，平行对比表明增强子ｘ序列可以将ｉｆｎ-α１ｂ表达提高４倍