恶性疟原虫多抗原表位基因的融合与表达

以霍乱毒素ｂ亚基（ｃｔｂ）基因为载体，构建了含不同抗原表位的恶性疟原虫的融合基因ｃｔｂ／ａｔｅ和ｃｔｂ／ａｗｔｅ。前者除含有恶性疟原虫裂殖子表面主要抗原表位杂合多肽基因ｓｐｆ６６外，还含有很强的ｔ辅助细胞表位ｃｓｔ３和ｔｃ细胞表位；后者在此基础上将我国发现的ｂ细胞表位ｎｋｎｄｄ基因经８次串联后融合其中。两种形式的融合基因经测序正确后转入大肠杆菌ｔｋ１０４６中，产量分别为１０ｍｇ／ｌ及５ｍｇ／ｌ。表达产物ｃｔｂ／ａｗｔｅ经亲和层析纯化双抗夹心ｅｌｉｓａ测定表明，该融合蛋白在保留了与抗ｃｔｂ抗体结合的同时，与抗ｎｋｎｄｄ单抗的结合效价达１：８０００。