玉米醇溶贮藏蛋白基因启动子pcr扩增及其驱动gus基因在转基因烟草种子中的表达

以玉米(zeamaysl.)黄化苗为材料，利用pcr技术扩增了玉米19kda醇溶贮藏蛋白基因(zein)起始密码子上游启动子片段，序列分析结果表明，克隆的-1～-694片段具有19kdazein启动子特点，与同一家族中其它基因的对应区段同源性达90％以上。将此启动子插入ppkgt的gus基因及nos终止子上游构成表达载体。经农杆菌转化烟草(nicotianatabaccumvar.samsum)，得到了转化植株。转化的烟草的pcr扩增及southern杂交证明目的片段已整合到烟草基因组中。转基因植株的gus活性检测表明，在叶、根中无gus活性，gus活性只存在于种子中。转基因植株烟草种子经冷冻切片，gus底物xgluc活体组织染色证明gus活性只存在一层介于种子胚乳与种皮之间的细胞中。