小鼠金属硫蛋白在聚胞藻中的金属诱导表达与纯化

应用蓝藻类金属硫蛋白基因启动子(smto-p)的金属诱导性，在单细胞的聚胞藻pcc6803中表达小鼠金属硫蛋白结构基因(mmt-1cdna)。在大肠杆菌hb101中构建含有smto-p和mmt1cdna的穿梭表达载体pkt-mre，经质粒转移，链霉素筛选，southern和western杂交分析鉴定得稳定的转基因工程藻落。同时，做小批量锌诱导表达，并纯化了外源蛋白，5l培养液含鲜藻重5.0g，得到3.5mgmmt-1；转基因藻在高金属浓度下的耐受性测定表明，外源基因的表达提高了蓝藻对金属离子的抗性，约为野生藻的2倍。