小鼠白细胞介素18在大肠杆菌中的表达、纯化及抗肿瘤作用研究

用rtpcr从小鼠肝脏细胞中扩增出小鼠白细胞介素18(mil18)的cdna,克隆到表达载体pjw2中,经热诱导后在大肠杆菌jm109中表达。表达的重组mil-18(rmil-18)主要以包涵体形式存在,占菌体总蛋白质的18%。包涵体用5moll尿素溶解后,经sephadexg-100柱纯化。纯化的蛋白质经透析复性,在0.5mglcona存在的条件下,能够对小鼠脾细胞具有剂量依赖的ifnγ诱生作用。以1×105h22肝癌细胞腹腔注射昆明小鼠,构建小鼠h22肝癌腹水瘤模型。分别在肿瘤细胞接种后1、4和8d,用10μg纯化产物对荷瘤小鼠进行腹腔注射。结果显示rmil18注射组小鼠死亡速率延缓,生存率显著提高(p<0.01),达到62.5%。首次证明mil-18对小鼠h22肝癌具有显著的抑制作用,经rmil18作用后存活小鼠具有对h22肝癌细胞的免疫记忆性