用腺相关病毒载体介导人血管内皮生长因子受体kdr胞外区基因的表达

新生血管大量形成在实体瘤的生长和转移中起着关键的作用。血管内皮生长因子(vegf)是介导肿瘤血管生成的最主要因素。从原代培养的人脐静脉血管内皮细胞(huvec)提取细胞总rna，采用逆转录pcr(rt-pcr)方法得到vegf受体kdr胞外区cdna片段。将获得的受体基因克隆到aav基因治疗载体psnav中，得到重组质粒psnav/kdr。重组质粒转染bhk细胞，加入辅助病毒后，获得了表达目的蛋白的重组aav。重组病毒表达的kdr在体外实验中具有与vegf结合的活性。在体内实验中，重组aav感染的黑色素瘤细胞在小鼠中形成肿瘤的血管化程度明显低于对照组。