|
生物工程学报 2001
次级淋巴趋化因子slc的克隆及其在原核系统中的表达Keywords: 次级淋巴组织,趋化因子,克隆,表达,趋化作用 Abstract: 以中国人的淋巴组织为材料抽提总rna,用rtpcr的方法扩增了次级淋巴组织趋化因子(secondarylymphoid\|tissuechemokine,slc)的成熟肽基因。序列分析表明,我们克隆的slc基因与文献报道的仅有一个核苷酸的差异,且并不影响氨基酸的编码。将slc的cdna插入含t7启动子的表达载体pet28a(+)中构建重组质粒pet-slc,转化大肠杆菌bl21(de3)筛选表达菌株。表达菌株经1mmol/liptg诱导表达3~5h后,超声破菌,离心后将上清进行sds-page,可以看到在18kd左右处有明显的表达条带。用ni2+亲和层析柱纯化表达产物,纯度达到90%以上。
|