人可溶性低密度脂蛋白受体在甲醇酵母中的表达

为获得低密度脂蛋白受体配基结合结构域在甲醇酵母中的分泌表达,首先用rtpcr方法以人肝癌bel7402总rna为模板扩增了编码低密度脂蛋白受体配基结合结构域的基因片段。核酸测序分析表明克隆到的dna片段的序列与报道的人ldlr的cdna序列相同。然后构建了甲醇酵母表达质粒ppic9ksldlr,并将其线性化后用电穿孔法导入pichiapastorisgs115。分别用sdspage、westernblot和ligandbindingblot对gs115ppic9ksldlr上清中的重组sldlr进行鉴定。sdspage和westernblot分析表明表达的sldlr的表观分子量为36kd。ligandbindingblot分析表明表达的sldlr具有配基结合的生物学活性