hnoc4l基因重组慢病毒表达载体的构建与鉴定

核糖体前体的形成和核运输需要多种核仁复合物的参与，hnoc4l是酿酒酵母s.cerevisiae的核仁复合物相关蛋白4的同源蛋白，并含有保守的noc结构域，但其功能未知。为了构建hnoc4l基因过表达的慢病毒载体，本实验通过将ef1α启动子替换原shrna慢病毒载体pll3.7的u6启动子，成功构建了慢病毒表达载体pll3.7-ef1，并进一步得到了hnoc4l基因过表达的慢病毒载体。利用慢病毒包装系统对不同物种的细胞进行感染，以此检测该重组慢病毒载体的包装效率，并通过构建的hnoc4l过表达的raw264.7稳定细胞系检测了该载体的免疫原性和稳定转染能力。结果表明成功构建了高效、长期稳定表达和免疫原性低的hnoc4l特异性表达的慢病毒载体，为进一步研究hnoc4l蛋白在哺乳动物核糖体生物发生中的调控作用奠定了基础。