应用电激法在大肠杆菌中导入外源性dna

本文报道用国产基因导科脉冲仪(ln－101型)，采用高压脉冲电场，将质粒dna和噬菌体dna成功地转化或转导人大肠杆菌。该电场单次电压脉冲范围1．okv一2．5kv(初电场强度2，8kv／cm一16kv／cm)、电容范围5—20μf，用质粒puc18和受体菌株dh5α，获得10　9－10　10转化子／μgdna。电场强度、电容及脉冲时间等不同的因素影响转化效率。转化率与dna的强度呈线性关系，与受体细胞密度成正比。dna和受体菌混合物在电激前，后的孵育时间，对转化效率影响不明显。用噬菌体m13mp19rf及受体菌株jml09，同样可获得较高的转化效率。