aspergillusfumigatus来源植酸酶的q23l和q23lg272e突变研究

aspergillusfumigatus来源的植酸酶具有热稳定性好、ph作用范围广的优点,但其比活性很低。设计的植酸酶q23l突变能在ph4.5～7.0范围内大幅提高比活性，但ph稳定性却显著下降,为了进一步改良q23l的ph稳定性,在q23l分子上加入了g272e突变。将原酶、突变酶q23l和突变酶q23lg272e分别在毕赤酵母gs115中表达，表达酶经纯化后进行酶学性质比较分析,结果表明：突变酶q23l的比活性比原酶显著提高,在ph5.5比活性由51u/mg提高到109u/mg,但其ph稳定性,尤其是在ph3.0～4.0酸性条件下的稳定性却显著降低，低于80%。突变酶q23lg272e在ph3.0～4.5和ph6.5～7.0时的稳定性比q23l有所提高,恢复到原酶的水平，而比活性基本维持在q23l的水平。通过一级序列和三维结构比较，分析了可能影响q23lg272e酶学性质的因素，为进一步研究植酸酶的结构与功能提供了材料。