新型阳离子基因传递载体pei-pblg的细胞转染研究

对新型阳离子聚合物pei(10kd)-pblg进行研究，重点考察其基因转染效率与细胞毒性，探讨其作为基因载体的可能性。通过粒径分析及扫描电镜（sem）观察pei(10kd)-pblg与质粒pegfp自组装形成的颗粒形态及粒径，预测其进入细胞的可能性。使用mtt比色法分析pei(10kd)-pblg、pei(25kd)-pblg、pei(10kd)和pei(25kd)的细胞毒性差异。选用表达增强型绿色荧光蛋白的质粒pegfp作为报告基因模型，将其与pei(10kd)-pblg自组装后，分别转染真核细胞株hela、cos-7、vero-e6和ecv304，应用流式细胞术检测细胞转染效率，并比较了血清、缓冲液、细胞谱等多种因素对基因转染效率的影响。pei(10kd)-pblg可包裹质粒形成粒径100～120nm的纳米复合物，适合介导质粒进入细胞。该纳米粒复合物对转染缓冲液的敏感度较低，并能够在10%血清存在的条件下，转染全部实验用细胞株，尤其对hela的转染效率最高，其次是cos-7、vero-e6和ecv304；其中pei-pblg(10kd)/pegfp复合物转染hela细胞的比率为45.02%，高于pei(10kd)/pegfp的29.16%；pei(10kd)-pblg的细胞毒性作用显著低于pei(25kd)、pei(10kd)和pei(25kd)-pblg。新型阳离子多聚物pei(10kd)-pblg在提高pei介导的基因转染效率的同时降低了其细胞毒性，提高了生物相容性，有望成为基因转移的有效载体。