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生物工程学报 2007
次级淋巴组织趋化因子(slc)基因克隆及在大肠杆菌中的表达Keywords: 次级淋巴组织趋化因子,基因克隆,表达,大肠杆菌 Abstract: 次级淋巴组织趋化因子(slc)是通过搜索表达序列标签(est)数据库克隆出来的一cc类趋化因子。以人slc序列为蓝本,利用重叠pcr(soe-pcr)的方法获得了适宜在大肠杆菌中表达的slc基因,将此序列分别克隆至表达载体ptmf和palm中,转化大肠杆菌,诱导表达。westernblotting鉴定结果表明目的蛋白以可溶蛋白和包涵体两种形式表达,两种形式的蛋白所占比例依培养和诱导条件的不同而变化。对两种形式的表达产物分别用ni-nta金属亲和层析和包涵体复性方法纯化,在实验中还对纯化条件进行了探索。对纯化蛋白的电泳结果显示:纯化样品的分子量比预期的分子量要大。
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