胸腺素a1与复合a干扰素融合蛋白的表达及其生物学活性

实验旨在获得具有双重生物学活性的重组胸腺素a1(thymosinalpha1,tm-a1)与复合a干扰素(ifna-con)融合蛋白。选择大肠杆菌偏爱的密码子,将合成的tm-a1与ifna-con编码序列构成的融和基因克隆至大肠杆菌表达载体pet-22b(+)、在宿主菌bl21(de3)-codonplus-rp-x中成功表达了可溶性融合蛋白(tm-a1-ifn-con)。表达量占总蛋白的20%以上。通过硫酸铵沉淀、疏水层析、阴离子交换层析、阳离子交换层析、分子筛层析后,产品纯度达到96%以上。采用细胞病变抑制法测定融合蛋白的抗病毒活性,采用细胞增殖实验检测融合蛋白对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响。结果表明,融合蛋白的抗病毒活性优于市售的ifna1b和ifna2a。对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响与市售的合成胸腺素a1相同。已有研究证实,该融合蛋白具有良好的体外抗hbv作用,其体外抗hbv活性比联合应用tm-a1和干扰素a强,且细胞毒性明显低于联合应用tm-a1和干扰素a。以上结果表明,通过大肠杆菌表达的可溶性融合蛋白(tm-a1-ifn-con),既具有良好的干扰素a抗病毒作用,也具有胸腺素a1促淋巴细胞增殖作用。