人红细胞生成素单克隆抗体的制备、鉴定及应用研究

用rhepo作为抗原，免疫balb／c小鼠，取其脾细胞与x63ag8．653小鼠骨髓瘤细胞融合，再碱性page方法进一步分离并纯化的rhepo，包被pvc板，对杂交瘤用ellsa方法进行筛选，获得两株稳定分泌抗hepo单抗的杂交瘤细胞株。经鉴定分别属于igg1、igg2b,轻链均为k链，kd分别为5．53×10-10mol／l和1．34×1o-10mol／l．用westernblot方法证明两者对hepo具有高度韵专一性．能特异地识别rhepo和尿源hepo。所制备单抗可作为亲和层析的配体，用于再生障碍性贫血病人尿中epo及哺乳类工程细胞所表达的hepo的分离、纯化，并可用于hepo的定量检测．