水稻巯基蛋白酶抑制剂cdna在大肠杆菌中的表达

根据从水稻未成熟种子cdna文库中筛选出的水稻巯基蛋白酶抑制剂(oryzacys-tatin)cdna序列，利用聚合酶链反应(pcr)技术扩增出oryzacystatin编码区，插入到温度敏感型大肠杆菌表达载体的ptpl启动子下游．该质粒带有温度敏感型阻遏子的编码基因cits857。转化大肠杆菌dh5a后。通过升温诱导，oryzacystatin在大肠杆菌中获得高教表达，sds—page表明分子量约为12kda。与预期结果一致，表达量占细菌可溶性蛋白总量的10％以上，对巯基蛋白酶的抑制活性检测表明，可溶性蛋白组分对木瓜蛋白酶有明显的抑制活力。