人参发根的诱导及其适宜培养条件的研究

利用发根农杆菌a4菌株在人参根外植体上直接诱导产生发根。在1/2ms固体培养基上建立起发根离体培养系，经连续多代的培养，发根仍保持旺盛生长状态。pcr扩增结果表明，发根农杆菌ri质粒的rolc基因已在人参发根基因组中整合并得到表达。液体培养基中发根生长速度约为固体培养的2倍。经对发根中人参皂苷含量及比生长速率的测定，筛选出高产发根系r9923。利用hplc法测定了r9923发根系中单体皂苷rg1、re、rf、rb1、rc、rb2和rd的含量，人参总皂苷含量达15.2mg/g。确定1/2ms培养液（30g/l蔗糖）、摇床转速110r/min、每２周更换一次培养液、继代培养时间4周，为人参发根生长适宜条件。探讨了培养容积、发根初始接种量以及分级放大培养工艺对发根大规模生产过程中生物产量和皂苷含量的影响。