降解2,4-二氯酚微生物的分离及其2,4-二氯酚羟化酶基因的克隆和表达

从土壤中分离到一株降解2,4-二氯酚能力较强的细菌菌株gt241-1，经鉴定该菌株属于假单胞菌属。菌株gt241-1在最适条件下能在48h内将90mg/l的2,4-dcp降解91%，能利用2,4-二氯酚、2,4-二氯苯氧乙酸、苯甲酸和儿茶酚为唯一碳源生长。采用southern杂交对2,4-二氯酚羟化酶基因（dcpa）定位后构建基因组文库，再用斑点杂交筛选目的转化子，克隆了该菌株的dcpa。序列测定得知含dcpa的亚克隆片段全长2389bp，其中dcpa基因编码区1797bp。核苷酸和氨基酸序列分析表明，dcpa与已在genbank登记的相关基因有一定的差异。dcpa基因能够在大肠杆菌转化子中成功地表达有生物活性的酶。