干旱胁迫下黄檗幼苗cdna消减文库的构建和分析

以干旱胁迫下的黄檗幼苗cdna为tester,正常生长的黄檗幼苗cdna为driver,利用抑制性消减杂交技术(suppressionsubtractivehybridization,ssh)构建了干旱胁迫下黄檗幼苗的消减文库并对其进行了est序列分析。从消减文库中随机挑取20个阳性克隆,提取质粒进行酶切和pcr鉴定,显示文库克隆的重组率大于95%,插入片段大小大部分集中在300~800bp之间。随机挑取816个克隆进行测序,得到265个基因。将其进行同源性分析,划分为16类。获得了热激蛋白70、脱水响应蛋白(rd22)、通用胁迫蛋白、金属硫蛋白(mtii),晚期胚胎丰富蛋白(lea14)等44种与干旱胁迫相关的基因,它们涉及了植物的渗透调节、信号传递、转录调控、活性氧清除等方面。本研究为抗逆基因克隆和系统研究干旱胁迫下黄檗基因的表达奠定了重要的理论基础。