来源于软化芽孢杆菌的环糊精葡萄糖基转移酶在毕赤酵母和枯草杆菌中的表达

通过pcr扩增软化芽孢杆菌a-cgt酶基因,将基因片段分别克隆到毕赤酵母表达载体ppic9k和大肠杆菌-枯草杆菌穿梭载体pma5中,分别转化毕赤酵母km71和枯草杆菌wb600。结果表明,重组毕赤酵母发酵上清液中a-cgt酶活性仅0.2u/ml,重组枯草杆菌产酶达到1.9u/ml。对重组枯草杆菌发酵条件进行了优化,当以tb为出发培养基,初始ph6.5,温度为37oc时,摇瓶培养24h后a-cgt酶环化活性达到4.5u/ml(水解活性为3200iu/ml),是野生菌株软化芽孢杆菌表达量的9.8倍。