类肌肽4(5)-丙氨酰胺-5(4)-羧酸咪唑的酶促合成及表征

肌肽(β-ala-l-his)是一种高效抗氧化剂,广泛应用于生物、化工、医药等领域。应用微水相酶促合成类肌肽,效率高价格低,且具有相似性质,开发前景广阔。本研究以l-丙氨酸和4,5-二羧酸咪唑制备类肌肽4(5)-丙氨酰胺-5(4)-羧酸咪唑,正交实验下的最佳合成条件为:四氢呋喃:ph8磷酸缓冲溶液＝10:1.6(v/v),l-丙氨酸:4,5-二羧酸咪唑=1:3(m/m),α-胰凝乳蛋白酶:底物=1:200(m/m),35oc下磁力搅拌1.5h。硅胶g60薄层色谱(tlc)分离反应产物,rf=0.81处出现新斑点;刮下该点纯化后进行紫外扫描,高效液相色谱(hplc)和核磁共振,紫外光谱253nm处吸收明显增强,310nm处出现新吸收峰;253nm、310nm、330nm高效液相色谱保留时间均为4.5min;13c核磁共振显示8组碳原子。结合胰凝乳蛋白酶的催化机理,得出产物结构为4(5)-丙氨酰胺-5(4)-羧酸咪唑。