毕赤酵母表面展示南极假丝酵母脂肪酶b全细胞催化合成葡萄糖月桂酸酯

利用表面展示南极假丝酵母脂肪酶b(candidaantarcticalipaseb,calb)的毕赤酵母细胞为全细胞催化剂,以葡萄糖为酰基受体,月桂酸为酰基供体,在非水相体系中催化合成糖酯。用硅胶柱层析对产物进行初提,再用制备液相色谱进一步分离纯化,并用高效液相色谱-质谱鉴定纯品性质。对该酶法合成糖脂反应体系进行了优化,其中考察了有机溶剂种类、复合溶剂体系中二甲基亚砜(dmso)体积百分比、酶量、底物摩尔比、水活度和温度等几个影响酯化反应的因素。结果表明:在5ml反应体系中,以叔戊醇/二甲基亚砜(dmso30%,v/v)为反应介质,添加初始水活度为0.11的全细胞催化剂0.5g,葡萄糖0.5mmol/l,月桂酸1.0mmol/l,60°c下反应72h后,葡萄糖月桂酸单酯的转化率达到48.7%。