人b干扰素与人血清白蛋白融合蛋白的表达及纯化

为开展人b干扰素-人血清白蛋白融合蛋白(ifnb-has)的临床前研究,本研究采用免疫学方法对毕赤酵母转化子进行筛选,得到高产菌株8株。在5l发酵罐上对高产菌株进行诱导表达,产量达500mg/l。发酵液经超滤浓缩、染料亲和层析、镍离子螯合亲和层析和deae离子交换层析纯化后,融合蛋白纯度达到96%。westernblotting杂交表明融合蛋白具有人血清白蛋白和人b干扰素的抗原性,细胞病变抑制法测定ifnb-hsa比活性为1.96×107iu/mg。建立了融合蛋白的生产工艺,为ifnb-hsa的临床前研究奠定了基础。