重组ptd-maxadilan的制备与鉴定

为了构建能够有效进入血脑屏障的新型融合蛋白ptd-maxadilan(ptd-max),设计编码融合蛋白ptd-max基因,克隆到表达载体pkyb,构建重组表达载体pkyb-ptd-max,转化大肠杆菌er2566中。采用iptg诱导由ptd-max、内含肽和几丁质组成的融合蛋白的表达。利用impact(inteinmediatedpurificationwithanaffinitychitin-bindingtag)介导的纯化系统制备目的融合蛋白ptd-max。所得的目的蛋白经激光飞行质谱测定分子量,结果与理论值相符。动物实验结果表明融合蛋白ptd-max能够有效穿越血脑屏障,重组ptd-max具有比天然maxadilan更显著(p<0.05)的抑制小鼠摄食的作用。融合蛋白ptd-max的构建和制备为其生物学功能的深入开发奠定了基础。