青霉素酰化酶基因的克隆与表达i．青霉素酰化酶基因的克隆

用ecori—psti双酶解的pbr322作为克隆载体，从大肠杆菌d816染色体克隆了青霉素酰化酶基因，这个基陶位于9．1kbecori片段上。所得克隆株整体细胞酶学特性与大肠杆菌d816一致，酶反应最适温度为55℃，最适ph为7．8—8．0。以青霉素g作为底物时km为10．3mm，转化产物为6一氨基青霉烷酸。克隆株大肠杆菌c600(ppal)合成青霉索酰化酶仍需苯乙酸诱导并被葡萄糖阻遏，细胞青霉素酰化酶的活性比大肠杆菌cp1(高2—4倍。