蚕豆叶绿体dnabamhi克隆库的构建及含16s-25srrna基因克隆的分析

蚕豆叶绿体dna(ct—dna)经bamhi酶切产生26个片段，最大的为14．00kb，最小的为0．42kb。本文以pbr322为载体，e．colihb101为受体菌，采用标准分子克隆法构建了蚕豆ct—dnabamhi克隆库，并从库中分离得到含叶绿体rrna基因的克隆。32p标记的e．coil16s、23srrna能和蚕豆ct—dnabamhi第6(b6，5．65kb)和第9(b9，4．70kb)个片段杂交，含有这二个片段的克隆分别命名为pvfb32和pvfbl6。利用几种限制性内切酶酶切和southern印迹法构建了pvfbl6的物理图谱。pvfbl6电镜下观察到有一变性环(a—t丰富区)，经hindi酶切，电镜观察定位此a—t丰富区位于16s和23srrna基因的间隔顺序内，推测该环可能与dna复制有关。