嗜水气单胞菌外膜蛋白基因ompts的高效表达及其免疫原性

根据嗜水气单胞菌外膜蛋白基因ompts的核苷酸序列设计引物，运用聚合酶链式反应（pcr）扩增出与预期大小相符的基因片段。将此基因片段克隆至质粒prseta的bamhi和ecori位点，构建重组质粒，转化大肠杆菌bl21（de3），经iptg诱导获得高效表达，sds-page蛋白电泳表明在39.9kd处出现超强特异带，占总蛋白的51％。以ni-nta-conjugate抗体进行westernblot分析证明该399kd的蛋白为所表达的融合蛋白。纯化融合蛋白注射雄性新西兰大白兔可诱导产生特异抗体。elisa和westernblot检测结果显示，该抗体与表达的融合蛋白和从嗜水气单胞菌中提取的36.9kd外膜蛋白均呈阳性反应，表明所表达的融合蛋白仍保持原有外膜蛋白的免疫原性，为此融合蛋白作为疫苗的候选成份提供理论基础。